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技術文章

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  • 20122-11
    Science技術新突破 觀測病毒內部

    生物通報道自從顯微鏡被發現以來,科學家們一直致力于改進這一技術用于顯示更小的細胞結構以深入了解人類細胞、細菌和病毒的內部機制。如今來自國立衛生研究員(NIH)下屬關節炎、肌肉骨骼肌皮膚疾病國家研究院(NIAMS)的研究人員開發了一種新技術可清楚觀察到病毒內的結構。他們在一期(1月13日)的《科學》(Science)雜志上報道了這一成果。生物通www.ebiotrade.com獲取:Bio-RadChemiDocMP多色熒光成像系統資料低溫電子顯微鏡(cryo-EM)技術是一種...

  • 20122-11
    華大基因、墨爾本大學Nature Genetics新文章

    摘要:生物通www.ebiotrade.com1月15日,來自澳大利亞墨爾本大學、華大基因等處的研究人員聯合在《自然遺傳學》(NatureGenetics)發表了題為“Whole-genomesequenceofSchistosomahaematobium”的研究論文,報告了對埃及血吸蟲(Schistosomahaematobium)全基因組測序的研究成果。索取:Millipore抑制劑技術手冊生物通www.ebiotrade.com生物通報道1月15日,來自澳大利亞墨爾本大...

  • 20122-11
    測序解析光合作用背后的機制

    摘要:生物通www.ebiotrade.com在近日召開的植物和動物基因組大會上,孟山都基因組分析中心的研究人員ToddMichael介紹了他們如何利用IonPGM測序儀對玉米石(又名白花景天)這種植物的基因組進行測序。在干旱條件下,這種植物可從標準的C3光合作用轉換到景天酸代謝(CAM)。索取:IonPGM測序資料生物通www.ebiotrade.com生物通報道在近日召開的植物和動物基因組大會上,孟山都基因組分析中心的研究人員ToddMichael介紹了他們如何利用Ion...

  • 20122-10
    抗甲狀腺球蛋白抗體檢測方法臨床意義

    過去用于檢測Tg自身抗體的方法有:沉淀試驗、間接免疫熒光(11F)、血凝試驗、ELISA和放射定量分析。目前常用IIF法和ELISA法。IIF法熒光圖形為在甲狀腺濾泡腔內出現波浪狀著染。在甲狀腺炎患者中抗TPO抗體檢測方法的靈敏度稍遜于抗Tg抗體,但實際上兩者的檢出率不相上下。用高靈敏度方法檢測Tg,可能會降低與疾病相關的特異性。一些評估Tg自身抗體特異性的研究表明,甲狀腺功能正常的個體與自身免疫性甲狀腺炎免疫應答之間存有一定的差別。正常人亦可產生能識別相同或具有交叉反應性抗...

  • 20122-10
    抗體標記直接法和間接法的選用

    很多免疫學技術依賴于標記抗體的使用。對抗體進行標記主要是用于抗原的定位分析,在某些情況下,也可以對混雜有大量其他分子的樣本中的抗原進行定量檢測。由于抗體與其相應抗原具有很高的親和力,因此帶有易識別標記物的抗體可以定位分析抗原,并且是一種理想的快速價廉的定量測定方法。需要使用標記抗體的三種方法,即免疫染色法、免疫印跡法和免疫分析。此三種方法均能定位復雜混合物中的抗原,而且通過適當的對照也能定量測定。就免疫染色法而言,其目的就是定位正常細胞環境中出現的抗原。在此背景下,所有抗原均...

  • 20122-10
    凝膠電泳前的蛋白質烷化

    1.如果使用經免疫沉淀法得到的蛋白,按常規洗滌免疫復合物。盡可能*去除zui后的洗液。如果使用其他來源的蛋白,則將其轉入20mmol/L的磷酸鹽溶液中(pH7.0),或直接在20/1l水中重懸蛋白。蛋白濃度應低于lmg/m1。2.加入20u1.5%SDS和20mmol/LDTI。3.加熱至85C10min,仔細將上清液移入另一試管。4.加入10rd新鮮配制的0.2mmol/LN-乙基順了烯二酰亞胺(NEM),12.5mg/m1的水溶液為飽和溶液),使用前臨時配制。85℃溫育1...

  • 20122-10
    用多聚甲醛固定懸浮細胞

    所有的固定方案必須做到:①防止抗原丟失;②透化細胞以便使抗體進入;③盡量使抗原保持能與抗體結合的狀態;④維持細胞正常結構。常用的固定劑種類很多,固定劑的正確選擇取決于被研究抗原的性質及所用抗體的特性。固定劑可分為兩大類:有機溶劑和交聯劑。有機溶劑如乙醇和丙酮能夠去除脂類物質使細胞脫水,把蛋白質沉淀在細胞結構上。交聯劑一般通過自由氨基基團把生物分子橋連起來,形成一個相互連接的抗原網。兩種方法均使蛋白質抗原部分變性。因此,在細胞染色中,能夠識別變性蛋白的抗體更加有用。在某些情況下...

  • 20122-9
    免疫親和純化的操作步驟

    1.主要內容純化率為1000~10000倍。快速純化抗原,層析柱常可重復使用。可獲得純化的抗原。不能用于定量測定。純化效果取決于抗原的濃度和抗體的親和力需要適當純化的抗體。2.操作步驟(1)將抗體結合到蛋白A或蛋白G微珠上。對于一般用途的層析柱,每毫升濕的微珠大約可以結合2mg單克隆抗體或親和純化的多克隆抗體。將抗體和蛋白A或蛋白G微珠混合制成稀薄的勻漿,在總量為10ml的溶液中加入大約lml微珠,室溫孵育1h,輕輕搖動混勻。(2)用10倍體積的0.2mol/L硼酸鈉(pH9...

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