sydlabs：核糖核酸酶 A 溶液

sydlabs：核糖核酸酶 A 溶液

核糖核酸酶 A (RNase A) 的用途是什么？除了 RNA 序列分析和 RNase 保護(hù)測(cè)定之外，RNase A 還常用于質(zhì)粒和基因組 DNA 純化以及蛋白質(zhì)提取過程。

胰腺核糖核酸酶是一種分泌酶，屬于胰腺核糖核酸酶家族。 RNase A 是一種核酸內(nèi)切酶，可裂解嘧啶堿基 3' 側(cè)的內(nèi)部磷酸二酯 RNA 鍵。 RNase A 更喜歡以聚 (C) 作為底物并水解 2',3'-環(huán)狀核苷酸。 RNase A 作用于單鏈和雙鏈 RNA。

MB120：RNase A 溶液

重組核糖核酸酶 A (RNase A) 是由酵母細(xì)胞產(chǎn)生的，帶有編碼基因工程牛胰腺核糖核酸酶的克隆基因。
CAS 號(hào)：9001-99-4。
歐共體：3.1.27.5。
分子量：13.7 kDa。
等電點(diǎn)：9.6。
pH范圍：6-10；在pH 7.6-8.0范圍內(nèi)具有高活性。
單位定義：當(dāng)酵母 RNA 在 37°C、pH 5.0 下水解時(shí)，1 個(gè)單位的 RNase A 酶會(huì)導(dǎo)致 260 nm 處的吸光度增加 1.0 個(gè)單位。五十個(gè)單位大約相當(dāng)于 1 個(gè)庫(kù)尼茨單位。
比活性：≥ 40 Kunitz 單位/毫克蛋白質(zhì)。
溫度曲線：建議溫度范圍15-70°C； 60°C 時(shí)具有很大活性。
消光系數(shù)：E ^1%  =7.1； 280納米。
純度：>95%（通過還原 SDS-PAGE）。每批 RNase A（溶液和粉末）均經(jīng)過測(cè)試，以確保不含蛋白酶、核酸內(nèi)切酶、核酸外切酶、DNase 和 DNA。使用前無需加熱。在 40 µg 蛋白酶 K 與 1 ug λ DNA 在 37°C 下孵育 6 小時(shí)的質(zhì)量控制程序中未檢測(cè)到 DNase。該制劑被認(rèn)為不含 DNase。
劑型：溶液。
溶液制備：要制備 10 mg/mL RNase A 庫(kù)存溶液，請(qǐng)將 10 mg RNase A 溶解在 1 mL 緩沖液中：10 mM Tris-HCl、15 mM NaCl，pH 7.5。
根據(jù)應(yīng)用，推薦的 RNase A 濃度為 1 至 100 µg/mL。要從質(zhì)粒制備物中去除 RNA，請(qǐng)使用 10 μg/ml 工作溶液并在室溫下孵育樣品 1 小時(shí)。為了制備雙鏈 cDNA 的“平端"，請(qǐng)使用 100 ng/ml 工作溶液。
活化劑：鉀鹽和鈉鹽。該酶在多種反應(yīng)條件下都具有活性。在低鹽濃度（0 至 100 mM NaCl）下，RNase A 切割單鏈和雙鏈 RNA 以及 RNA-DNA 雜交體中的 RNA 鏈。然而，當(dāng) NaCl 濃度為 0.3 M 或更高時(shí)，RNase A 會(huì)特異性切割單鏈 RNA。
抑制劑：通過 His 12 和 His 119 的烷基化。RNase A 對(duì)玻璃表面具有高親和力。在中性 pH 值和高濃度 (>10 mg/ml) 下，酶會(huì)沉淀。該酶受到焦碳酸二乙酯 (DEPC)、胍鹽 (4 M GuSCN)、β-巰基乙醇、重金屬和 RNase 抑制劑（如 RIBOPROTECT (RT33)）的抑制。為了從樣品中去除酶，請(qǐng)使用旋轉(zhuǎn)柱或多次苯酚/氯仿萃取進(jìn)行分離。

運(yùn)輸：重組 RNase A 溶液用冰袋運(yùn)輸。收到后，立即將其存放在下面建議的溫度下。
穩(wěn)定性和儲(chǔ)存：
使用手動(dòng)除霜冰箱并避免重復(fù)凍融循環(huán)。
如果儲(chǔ)存在 -20 至 -70°C 下，自收到之日起 24 個(gè)月。
如果儲(chǔ)存在 2–8°C，則自收到之日起 12 個(gè)月。
如果儲(chǔ)存在 -20 至 -70°C 下，重構(gòu)后可保存 12 個(gè)月。

sydlabs：核糖核酸酶 A 溶液