ludger 2-AB 聚糖標記試劑盒

ludger  2-AB 聚糖標記試劑盒   產(chǎn)品代碼：LT-KAB-A2

2-AB（2-氨基苯甲酰胺）是糖基化分析中使用廣泛的熒光標記之一。 LudgerTag 2-AB 標記試劑盒包含標記多達 24 個聚糖樣品所需的所有試劑。

有兩種套件可供選擇，其所提供的還原劑類型有所不同：氰基硼qing化na或無毒的 2-甲基吡啶硼*。

部件號 還原劑
LT-KAB-A2 氰基硼qing化鈉 – 24 個樣品
LT-KAB-VP24 2-甲基吡啶*烷 – 24 個樣品

用于用 2-氨基苯甲酰胺酸 (2-AB) 標記游離聚糖。氰基*氫hua鈉還原劑。套件足以容納 24 個樣品。

產(chǎn)品規(guī)格

應(yīng)用：用于用 2-氨基苯甲酰胺酸 (2-AB) 標記游離聚糖。

描述：該試劑盒包含通過還原胺化反應(yīng)將染料綴合至聚糖的游離還原端的試劑。

傳統(tǒng)的 2-AA 和 2-AB 標記試劑盒在聚糖標記過程中使用氰基硼氫hua鈉作為還原劑。該試劑有毒，因此在操作過程中應(yīng)使用通風(fēng)柜。為了符合新興的健康和安全法規(guī)，我們現(xiàn)在將其替換為新的 VP 聚糖套件，該套件使用甲基吡啶*烷，這是一種明顯更安全的還原劑。

2-AB 標記試劑盒包含兩套以下試劑（每套 15 個樣品），裝在玻璃安瓿中，在純氮氣下密封：

LT-KAB-A2
2-氨基苯甲酰胺（2-AB 染料）
二甲亞砜 (DMSO)乙酸...

LT-KAB-VP24
2-氨基苯甲酰胺（2-AB 染料）
二甲基亞砜 (DMSO) / 乙酸溶液
2-甲基吡啶硼*

樣品數(shù)量一個 2-AB 標記套件包含可標記多達 30 個獨立分析樣品的試劑

HPLC 測定染料純度>99%

分子量137

Lambda-Ex 250 nm

Λ-Em 428 nm

樣品量每個樣品含有 25 pmol 至 25 nmol 聚糖。

合適的樣品任何具有游離還原末端的純化聚糖都可以被標記。

結(jié)構(gòu)完整性未檢測到（< 2 摩爾%）唾液酸、巖藻糖、硫酸鹽或磷酸鹽的損失。

標記效率通常 > 85 %（取決于樣品）。

標記選擇性本質(zhì)上是化學(xué)計量標記。

方案
1. 純化聚糖：LudgerClean EB10 柱 (LC-EB10-A6) 設(shè)計用于從蛋白質(zhì)、鹽和洗滌劑中純化聚糖。

2. 將樣品轉(zhuǎn)移到反應(yīng)瓶中：對于從典型糖蛋白獲得的聚糖庫，樣品量應(yīng)在 100 皮摩爾 – 50 納摩爾范圍內(nèi)。使用單個純聚糖，只需 5 皮摩爾即可在后續(xù) HPLC 分析中進行標記和檢測。合適的反應(yīng)瓶包括小型聚丙烯微量離心管和用于 PCR 工作的管。

3. 干燥樣品：如果樣品體積超過10 μL，則干燥樣品。
如果樣品需要干燥，則應(yīng)使用離心蒸發(fā)器來完成。如果不可能，則可以謹慎使用冷凍干燥（凍干）（特別是確保樣品在小瓶底部干燥成小而致密的物質(zhì)）。請勿將樣品置于高溫 (>28°C) 或一定 pH 條件下，因為這些條件會導(dǎo)致酸催化的唾液酸損失（高溫、低 pH 值）或聚糖還原末端的差向異構(gòu)化（高 pH 值）。
樣品干燥后，將聚糖重新溶解在 10 μL 水中。

4.（僅限 LT-KAB-A2）制備 DMSO-乙酸混合物：將 150 μL 冰乙酸添加到 DMSO 瓶中，并通過移液器動作混合。

5. 添加染料：將 DMSO-乙酸混合物添加到裝有 2-AB（2-氨基苯甲酰胺酸）染料的小瓶中，并混合直至染料溶解。

6. 添加還原劑：將溶解的染料添加到裝有氰基硼氫hua鈉或甲基吡啶甲硼*的小瓶中，并通過移液器動作混合直至還原劑全溶解，制成很終的標記試劑。

7. 將標記試劑添加到樣品中：將標記試劑添加到每個干燥的聚糖樣品中，蓋上微管，充分混合。

8. 孵育：將反應(yīng)瓶放入加熱塊、沙盤或設(shè)定為 65°C 的干燥箱中，孵育 3 小時。在大多數(shù)情況下，孵育時間可以縮短至 2 小時或延長至 4 小時，而不會顯著改變標記反應(yīng)的結(jié)果。

9. 離心并冷卻：孵育期結(jié)束后取出樣品，短暫離心微管，然后讓其冷卻至室溫。

10. 樣品清理：建議進行標記后樣品清理，以去除多余的染料和其他標記試劑。

Ludger 提供全系列的產(chǎn)品和耗材，用于使用液相色譜 (LC)、質(zhì)譜 (MS)、LC-MS 或毛細管電泳 (CE) 等分析平臺進行糖基化樣品制備、表征和分析。這包括用于釋放和標記單糖或唾液酸的試劑盒、N-或O-聚糖標記試劑盒以及聚糖清理/純化和富集系統(tǒng)。我們還提供系統(tǒng)適用性標準品、定性和定量控制、高效液相色譜 (HPLC) 和超高效液相色譜 (uHPLC) 色譜柱和緩沖液，為您的所有聚糖分析需求提供一站式服務(wù)！

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