酶活性分析法檢定蛋白質

方法步驟：
1） 吸取20 μL 的蛋白質樣本，小心注入微量滴定盤中，避免氣泡產生。
2） 每一樣品槽加入200 μL 基質液，混合均勻；可用燒熱的接種環去除氣泡。
3） 靜置約1~2 min，顏色開始加深，然后加入30 μL 終止液。 反應時間的長短，要以樣本中的酶活性大小來做調整。因為我們只測定色析法各分劃的相對酶活性，因此并不加終止液。
4） 以ELISA 光度計測定波長415 nm 的吸光值。

酶活性單位的測定：
a. 以上步驟，只可測定GUS 活性的相對大小，對色析法所得到的各個分劃進行偵測，相當方便，但并非酶活性單位的測定方法。
b. 若要測定酶的活性單位，要使用zui適當的酶用量，使酶在反應一段固定的時間后，其生成物的呈色吸光度，落在光度計的可測范圍的內；然后計算此段時間內，每分鐘所產生的吸光度增加量，轉換成生成物的莫耳數，即可求得其真正的活性單位。
c. 因此酶的活性單位定義為：每分鐘所能催化生成物的 μmole 數。

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