在分子生物學、細胞生物學、基因治療和生物制藥等前沿科研領(lǐng)域，基因轉(zhuǎn)染技術(shù)是實現(xiàn)外源DNA、RNA或蛋白質(zhì)導(dǎo)入真核細胞的核心手段。通過轉(zhuǎn)染，研究人員可以研究基因功能、調(diào)控蛋白表達、構(gòu)建穩(wěn)定細胞系或開發(fā)基因療法。在眾多轉(zhuǎn)染試劑品牌中，Invitrogen™憑借其性能、廣泛的細胞適用性和高度的可重復(fù)性，成為全球?qū)嶒炇倚刨嚨钠放啤?

一、什么是轉(zhuǎn)染？Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑為何重要？

轉(zhuǎn)染是指將外源核酸（如質(zhì)粒DNA、siRNA、mRNA、CRISPR/Cas9組件）導(dǎo)入哺乳動物細胞的過程。由于細胞膜具有天然屏障作用，裸露的核酸難以進入細胞，因此需要借助轉(zhuǎn)染試劑作為“分子載體”，幫助核酸穿越細胞膜并釋放到細胞質(zhì)或細胞核中。

Invitrogen自20世紀90年代推出脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑以來，持續(xù)創(chuàng)新，開發(fā)出適用于不同細胞類型、實驗?zāi)康暮蛻?yīng)用場景的全系列轉(zhuǎn)染產(chǎn)品。其試劑以高轉(zhuǎn)染效率、低細胞毒性、操作簡便著稱，廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、藥物篩選、疫苗開發(fā)和基因編輯等領(lǐng)域。

二、Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑核心產(chǎn)品線與技術(shù)原理

Invitrogen的轉(zhuǎn)染試劑主要基于以下幾種技術(shù)平臺：

1.Lipofectamine™系列：脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的黃金標準

-Lipofectamine™3000：適用于大多數(shù)貼壁和懸浮細胞，尤其對難轉(zhuǎn)染細胞（如原代細胞、干細胞）表現(xiàn)出色。它利用陽離子脂質(zhì)與核酸形成脂質(zhì)體復(fù)合物（lipoplexes），通過內(nèi)吞作用進入細胞，并在內(nèi)體中釋放核酸。配套的P3000™增強劑可進一步提升效率。

-Lipofectamine™2000：經(jīng)典款，廣泛用于HEK293、HeLa等常用細胞系，轉(zhuǎn)染效率高，成本適中。

-Lipofectamine™RNAiMAX：專為小RNA（siRNA、miRNA）設(shè)計，實現(xiàn)高效的基因沉默（RNA干擾），廣泛用于功能基因組學研究。

-Lipofectamine™MessengerMAX：專為mRNA轉(zhuǎn)染優(yōu)化，適用于瞬時蛋白表達、疫苗研發(fā)和基因編輯（如Cas9 mRNA遞送）。

2.Polyethylenimine(PEI)基試劑：高性價比的聚合物選擇

-PEI MAX™：一種線性陽離子聚合物，通過與DNA形成緊密復(fù)合物實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染。特別適用于大規(guī)模質(zhì)粒生產(chǎn)和懸浮細胞轉(zhuǎn)染（如CHO、HEK293細胞），在生物制藥工業(yè)中用于瞬時表達重組蛋白。

-JetPEI®（Invitrogen授權(quán)品牌）：性能穩(wěn)定，適用于難轉(zhuǎn)染細胞。

3.其他專用試劑

-Fugene®HD（原Roche，現(xiàn)由Invitrogen分銷）：低毒性，適用于敏感細胞。

-ScreenFect®系列：針對高通量篩選優(yōu)化。

三、技術(shù)優(yōu)勢與應(yīng)用特點

1.高轉(zhuǎn)染效率

在優(yōu)化條件下，可達80%以上的轉(zhuǎn)染率，確保實驗結(jié)果的顯著性和可重復(fù)性。

2.廣泛的細胞兼容性

覆蓋HEK293、HeLa、CHO、HepG2、神經(jīng)元、原代細胞、干細胞等多種細胞類型。

3.低細胞毒性

經(jīng)過優(yōu)化的配方減少對細胞代謝的干擾，維持細胞活力，適合長期實驗。

4.操作簡便

多數(shù)試劑采用“混合-加入”一步法，無需更換培養(yǎng)基，適合高通量操作。

5.多功能性

支持DNA、siRNA、miRNA、mRNA、CRISPR核糖核蛋白（RNP）等多種核酸類型的遞送。

四、典型應(yīng)用場景

1.基因功能研究

過表達或敲低特定基因，研究其在信號通路、細胞周期、凋亡中的作用。

2.蛋白質(zhì)表達與純化

瞬時轉(zhuǎn)染表達重組蛋白，用于結(jié)構(gòu)生物學或抗體生產(chǎn)。

3.RNA干擾（RNAi）

使用siRNA或shRNA實現(xiàn)靶基因沉默，篩選功能基因。

4.基因編輯

遞送CRISPR-Cas9質(zhì)粒或RNP復(fù)合物，實現(xiàn)基因敲除、敲入或堿基編輯。

5.啟動子與調(diào)控元件分析

轉(zhuǎn)染報告基因載體（如luciferase），研究啟動子活性。

6.疫苗與基因治療研發(fā)

mRNA疫苗開發(fā)中，高效遞送編碼抗原的mRNA至細胞。

五、使用建議與優(yōu)化策略

-細胞狀態(tài)：使用對數(shù)生長期、高活力（>90%）的細胞；

-核酸質(zhì)量：使用高純度、無內(nèi)毒素的質(zhì)粒DNA；

-試劑與核酸比例：遵循說明書推薦比例，可進行梯度優(yōu)化；

-血清影響：部分試劑（如Lipofectamine™2000）可在含血清培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)染，提高細胞存活率；

-轉(zhuǎn)染后處理：根據(jù)實驗需求，在適當時間收集細胞或進行功能檢測。

六、結(jié)語

Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑不僅是實驗室的常規(guī)耗材，更是推動生命科學研究進步的關(guān)鍵工具。其不斷創(chuàng)新的產(chǎn)品線，為科學家提供了高效、可靠、靈活的基因遞送解決方案。無論是在基礎(chǔ)科研的探索中，還是在生物醫(yī)藥的產(chǎn)業(yè)化進程中，Invitrogen都以其性能和全球技術(shù)支持體系，贏得了廣泛贊譽。掌握其使用技巧，優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，將幫助研究人員更高效地實現(xiàn)基因操控，解鎖生命科學的無限可能。