豬丹毒分子生物學(xué)診斷技術(shù)

 

    常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)檢測豬丹毒至少要3天，鑒定血清型大約要lo天，而這種PCR法可在5h內(nèi)完成。它使用兩步擴(kuò)增法，先用高度特異性引物組M0101-M0102進(jìn)行初步擴(kuò)增之后，再添加4種特異性寡核苷酸引物組對4種不同血清型豬丹毒的16SrRNA序列進(jìn)行擴(kuò)增。

 

    rRNA基因簇包括16SrRNA、23SrRNA、5SrRNA、下游非編碼區(qū)。對該簇編碼的DNA序列進(jìn)行測定，以設(shè)計種特異性PCR檢測系統(tǒng)的引物。豬紅斑丹毒絲菌2型、3型、18型及扁桃體丹毒絲菌血清?型的rRNA基因的DNA序列的同源性在96．0％一98．4％。

 

    以前DNA探針雜交法和常規(guī)PCR都不能區(qū)分豬丹毒屬這4種血清型，而這種PCR擴(kuò)增法是特異的，能逐一區(qū)別鑒定，而且它可以從患病動物的組織樣品中直接進(jìn)行PCR試驗并得出結(jié)果。整個試驗不超過5h，這種對編碼rRNA基因簇的DNA序列的特異性系統(tǒng)PCR擴(kuò)增法十分，易讀顯示結(jié)果，可快速診斷屠宰場豬丹毒菌感染豬。